中性红是一种弱碱性 pH 指示剂,变色范围在 pH6.4~8.0 之间(由红变黄)。分子式为C15H16N4·HCl,分子量为 288.78。在中性或微碱性环境中,植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌。由于液泡在一般情况下呈酸性反应,因此,进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色,在这种情况下,原生质和细胞壁一般不着色。死细胞由于原生质变性凝固,细胞液不能维持在液泡内,用中性红染色后,不产生液泡着色现象,相反,中性红的阳离子,却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合,而使原生质与细胞核染色。
中性红染色液(Neutral Red stain,1%)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成红色的染色液,常用于组织或细胞染色中细胞核的红色复染。
自备材料:
1、4%多聚甲醛
2、蒸馏水
3、系列乙醇
操作步骤(仅供参考):
1、样品处理
a)对于石蜡切片:
二甲苯中脱蜡 5~10min。
换用新鲜的二甲苯,再脱蜡 5~10min。
无水乙醇 5min。
90%乙醇 2min。
70%乙醇 2min。
蒸馏水 2min。
b)对于冰冻切片:
蒸馏水 2min。
c)对于培养细胞:
用 4%多聚甲醛固定 10min 以上。
蒸馏水洗涤 2min。
换用新鲜的蒸馏水,再洗涤 2min。
2、中性红染色
a)对于上述处理好的样品,用 Neutral Red stain(1%)染色 2~5min。
b)用蒸馏水或自来水充分洗涤。
c)进行观察和拍照。
中性红是一种弱碱性 pH 指示剂,变色范围在 pH6.4~8.0 之间(由红变黄)。分子式为C15H16N4·HCl,分子量为 288.78。在中性或微碱性环境中,植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌。由于液泡在一般情况下呈酸性反应,因此,进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现樱桃红色,在这种情况下,原生质和细胞壁一般不着色。死细胞由于原生质变性凝固,细胞液不能维持在液泡内,用中性红染色后,不产生液泡着色现象,相反,中性红的阳离子,却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合,而使原生质与细胞核染色。
中性红染色液(Neutral Red stain,1%)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成红色的染色液,常用于组织或细胞染色中细胞核的红色复染。
自备材料:
1、4%多聚甲醛
2、蒸馏水
3、系列乙醇
操作步骤(仅供参考):
1、样品处理
a)对于石蜡切片:
二甲苯中脱蜡 5~10min。
换用新鲜的二甲苯,再脱蜡 5~10min。
无水乙醇 5min。
90%乙醇 2min。
70%乙醇 2min。
蒸馏水 2min。
b)对于冰冻切片:
蒸馏水 2min。
c)对于培养细胞:
用 4%多聚甲醛固定 10min 以上。
蒸馏水洗涤 2min。
换用新鲜的蒸馏水,再洗涤 2min。
2、中性红染色
a)对于上述处理好的样品,用 Neutral Red stain(1%)染色 2~5min。
b)用蒸馏水或自来水充分洗涤。
c)进行观察和拍照。