CTAB抽提液

产品简介:

CTAB法是从植物样本中提取DNA的一种经典方法，可以用于多种类型的植物样本。CTAB(hexadecyltrime- thylammonium bromide，十六烷基三甲基溴化铵)是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度的溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7M NaCl)，CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物而不沉淀核酸。通过有机溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入醇(乙醇或异丙醇)沉淀即可使核酸分离出来。

本产品的成分包括CTAB，Tris，EDTA，NaCl等。

使用方法(仅供参考):

DNA提取

1.取适量的CTAB抽提液，按照抽提液:还原剂β-巯基乙醇(客户自备)=500:1的比例混匀，例如1mlCTAB抽提液中加入2ul还原剂，混匀后置于65°C预热，建议现配现用。

2.取适量的新鲜植物组织或者叶片，液氮预冷，研磨成吸粉状，装入离心管中。

3.向粉碎后的组织中按照100mg粉末加入0.5ml预热的抽提液，充分混匀，65C孵育30-60min，期间适量振荡混匀。

4.14000g常温离心5min，转移上清至新的离心管中。

5.在上清中加入1/100体积的RNaseA溶液(10mg/ml)(BL543A)，如500μl上清液加入5μl RNaseA溶液，37℃处理20min。

6.加入等体积的Tris饱和酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)，轻缓颠倒离心管，混匀8-10次，14000g常温离心10min,转移上清至新的离心管中(为提高DNA纯度，该步骤可重复一次)。

7.加入等体积的氯仿/异戊醇(24:1)或者氯仿，颠倒混匀8-10次，14000g常温离心10min，取上层水相，转移至新的离心管中。

8.加入0.6倍体积的异丙醇(可-20℃预冷)，轻轻混匀，-20℃静置30min。

9.14000g4℃离心10min，小心弃上清，不要影响到管底的核酸沉淀

10.加入1ml70%乙醇，室温静置10min，14000g4℃离心3min，小心弃上清，不要影响到管底的核酸沉淀。

11.14000g4℃离心1min，用移液器洗尽残余乙醇，超净台吹干核酸沉淀，等乙醇味道散去后加入适量的纯水或者TE缓冲液溶解，低温保存，注意干燥时间不宜过长导致干燥彻底，核酸不易溶解。

注意事项:

1.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件:常温储存，一年有效。